栽培点滴

【专业】菌种培养两三事
2019-12-24 15:48:28

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术业有专攻,赵先生根据自己种植食用菌的经验,给予了一些虫草菌栽培的经验之谈。

何菌类的生产,都离不开菌种。母种品质要求:有光泽,整齐,洁白浓密。

 

 

 

(外购的蛹虫草菌母种)

 

>> 菌种有多种分类法:


按状态可分为固体菌种、液体菌种、半固体菌种。虫草栽培,大多采用液体菌种。

  

液体菌种需要接入试管母种,也就是上面图片上的。或者接入由上面图片上的母种转接扩大培养而成的栽培种,也叫生产种。

 

外购的母种,由于数量和价格原因,一般需要扩大繁殖一到三代。分别称为原种、栽培种和生产种。多数情况扩繁到栽培种,所以现在把栽培种与生产种混称,都是第三代,转扩的第一批,就是第一代了。  

 

 

这些都是称呼的不同,购入的菌种经过多少代转扩,只有菌种生产厂家清楚,没有严格按照这个来出厂的。

 

 

 

(赵先生自制的转管培养基)

 

>> 转管的准备:

 

 

 

1) 试管
一般从化学药品商店可以购到。如果有经验,可以用烧杯、罐头瓶、盐水瓶等一切耐高温的容器替代。试管口可以用棉花、硅胶塞、牛皮纸等封口,目的是防止杂菌的入侵。

 

2) 棉花
必须用有机棉,千万不要用蓬胶棉。也不要用医院的脱脂棉。硅胶塞现在比较流行,不过用它进行高温灭菌时需要注意,不能过紧的堵住试管口,否则会:嘭的一下,喷出去。

 

棉花有二种方法制备。一种是折叠法,这个需要熟练工。另一种是用虎口塞的方法,老少皆宜。  

 

棉花处理完,需要定型,否则对于经验不多的人,转管时会被棉花丝影响到。

 

3) 灭菌高压蒸锅
定型通常采用高压锅,其实还有个更加简单的方法,用微波炉,中等火力,二分钟,ok。高压锅的选择,用家用的即可。现在只有苏伯尔牌子合格,其他压力都不够用。其他牌子的,可以延长时间。建议试管用40分钟,排气开始计时。如果是小瓶液体,建议一个小时。

 

>> 转管培养基的准备

 

有天然动植物提取的,也有化学合成的。

  

动植物提取的,有马铃薯,胡萝卜,豆芽,魔芋,糖,奶粉,牛肉膏,酵母粉等;化学合成的有硫酸镁,磷酸二氢钾等。为了便于观察污染、生长及提纯,普遍使用琼脂,由石花菜提取。如果经验丰富,可以不用它。

 

培养基的通用配方:马铃薯200克,煮汁。葡萄糖20克,琼脂20克,水(包括马铃薯的汁)1000毫升。配方中有硫酸镁和磷酸二氢钾,实际上没有什么用处,都是科研机构的噱头,可以不用。

 

其他配方:胡萝卜100克,葡萄糖20克,水1000毫升。这个比较适合金针菇的培养,也适合初学者。原因就是胡萝卜有抑菌作用,容易成功。一定买不上化肥的啊。

 

这里有个小问题需要注意:水用自来水即可,矿泉水也可以。不要用纯净水,这里边缺少微量元素。如果在农村,用的是井水,一定要事先化验一下ph值。过酸过碱的水不能使用。

 

>> 接种操作的准备

 

接种工具


一般经常使用的,只有接种锄和接种铲,其他如接种针、环、刀等,多用于提取母种而非转管。其他辅助用具有:酒精灯、棉花。接种环境要求无菌,一般使用超净工作台,离子机,接种箱。以接种箱最便宜。如果没有,可以用纸箱自制,效果一样。不要羡慕贵的设备,这个以实用为目的。

 

酒精灯用的酒精,建议使用甲醇,它的酒精含量高,容易点燃。手部消毒使用乙醇,70-75%酒精含量皆可。

 

杀菌消毒


使用离子机的,需要注意,它经常会因为受潮发生短路,造成机器响而事实上不出离子风,造成接种污染。发生这种情况,只需要用烫发的吹风机对电路板吹高温风就可以修复。

 

不支持使用紫外线灯消毒,这个会造成人员的恶心呕吐晕眩。比较理想的是负离子机和活氧机。不支持使用甲醛熏蒸,也不支持使用氯制剂,它们没有什么好处。现在的一些烟雾熏蒸制剂,尽可能不使用,对人体没有什么好处。

 

接种铲


接种铲和接种锄用细铁丝或者自行车车条自制即可。锄和铲用于试管斜面的纵向和横向切割。

>> 接种操作过程

 

 

 

转管时需要注意,尽可能把有菌丝的菌片(块)朝上,这样有利于发菌。如果急用,可以采用二点接种,即于斜面上的三分之一和三分之二处各接一点。如果经验丰富,可采用无菌水,沾菌液转管,速度快且可接远远超过常规的试管数量。不过,这种方法容易污染,不适合初学者。

 

母种品质要求:有光泽,整齐,洁白浓密。转管后三天,需要注意杂菌污染。试管菌种保存,可放于冰箱冷藏室,4℃。

 

转管后,一般7-15天即可长满。如果数量不够,可以继续扩繁。所接的菌种块不要过大,过大容易污染。也不要过小,过小容易被游离水“淹死”-缺氧。大米粒大小即可。

 

>> 液体菌种的制备

蛹虫草栽培只有少数人使用固体菌种,大多用液体菌种。 

 

液体菌种的生产比固体要求严格,多数栽培者需要外购。很多栽培者使用的液体菌种,为菌悬液。其实就是菌丝浮在液面上静止培养。由于不需要通气发酵,避免了空气过滤不好污染菌种,所以比较容易成功。 

 

菌悬液的缺点就是菌体量级小,容易硬块化,不方便用喷枪接种。还有一种方法,就是固体菌种液化技术,这个方法如果使用好了,也不错,只是目前不太成熟,还没有规模使用。如果有匀浆机,无菌条件下将固体菌种液化,发酵24-36小时即可使用,应该成为以后的发展方向。  

 

液体菌种缺点大于优势。主要缺点:


一、不方便保存,一般七天就坏了或者自溶。
二、不方便运输。
三、要求条件高,不容易操作。
四、仅限于熟料栽培。
五、设备投资过大。 
 
不要相信液体菌种生产设备厂家的忽悠,它们的产品基本上为一级发酵,违背了三级发酵的规律,所以坏罐的比例非常高。同时,也不要相信食用菌教科书和科研报告上的液体菌种生料栽培和发酵料栽培,成功率都非常低且需要前提条件。

 

如果不是用于虫草栽培,建议不要使用液体菌种,没什么优势,反而容易出大问题。忠言逆耳,这些都是头破血流的经验,初学者一定听劝,食用菌这行没有什么捷径,老老实实的最好。千万不要相信什么高科技和高人。

 

 

 

(九头山蛹虫草液体菌种)

 

采用深层发酵,经常会因为配方的原因,发酵时起泡,特别是接近于放罐时生成大量的泡沫,一般用泡敌消泡。可以用几滴豆油来处理,基本上就可以解决了。

 

液体菌种生产,不要听信书籍上说的百分百无菌,事实上做不到!一定要明白,液体菌种生产,一样遵循生物优势这个规律,即菌种优势大于杂菌。 

 

为了这个规律实现,接种时不要用书籍上介绍的接入一二片菌块,直接接入一支试管。接入方式,建议用无菌水刮下菌苔直接倒入,又方便又快速。接入后直接通气,不要按书籍上的等一二天菌丝萌发再通气,不给杂菌扩繁的时间。 

 

书上会告诉你,这样省电。包括电磁发酵装置也告诉你,转几分钟停几分钟省电,有利于菌丝恢复生长。以上说法,纯粹瞎扯。一停一开,空气正好一进一出,反而容易污染。

 

>>不建议在发酵液里添加化学药品


没有多少帮助,成本核算上,不如多添一把火,增加灭菌效果更好。如果非要添加,建议使用小苏打,一可以使培养液碱性,防止粮食类的偏酸;二可以变相降低沸点,增加灭菌效果;三抑制杂菌。添加量为1%。可以添加,不可以依靠。

 

记住:从培养料加水开始,污染也就开始了,一定要快速配置,快速灭菌。微生物大约20-30分钟扩繁一代,它们会产生活性物质,即使灭菌后,也会抑制菌丝生长。所以,速度很重要。

 

 

 

(赵先生自制的特殊菌种)

最后编辑时间于

2020-10-29 08:21:29

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